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旦鼎簡談PCR儀的種類和選購
更新時間:2023-05-25   點擊次數(shù):602次

【PCR儀的種類】
  分類總是五花八門,總體來說可以分為PCR擴增儀和實時熒光PCR儀兩大類,有人也把它們稱為半自動和全自動,或者定性和定量,都是比較不準確的稱呼。

  PCR最重要的就是個升降溫過程,最初的水浴鍋式PCR,就是三個水浴箱,一個機械臂,定時抓出反應(yīng)槽轉(zhuǎn)換水浴鍋。這種東東體積大,迅速慢,但其實結(jié)果并不比以后的PCR儀差,我現(xiàn)在都很欣賞。后來有人利用致冷和加熱做成了,固定位置升降溫的PCR擴增儀。


  后來隨著定量技術(shù)的發(fā)展,有公司將擴增儀和檢測做成一體,也就成了現(xiàn)在所謂的全自動(或定量)PCR儀。當然標準的叫實時熒光定量PCR儀。

  【品牌】

  什么東西都有品牌,現(xiàn)在國內(nèi)國外PCR儀的品牌很多,就國外而言比較著名的有:

  ABI美國應(yīng)用生物公司:老牌的生物公司貴族,其收購了原來的PE,而PE公司是PCR的*,旗下有很多經(jīng)典的PCR儀,有5700(已停產(chǎn))、7700(已停產(chǎn))、7000、7900等實時熒光定量PCR儀。

  ROCHE羅氏診斷:炙手可熱的新貴,LIGHTCYCLER是其的PCR儀,市場做得很不錯,以科研定位為主,但在國內(nèi)很多醫(yī)院使用,其很特色離心、氣加熱、毛細管等,設(shè)計另類,是最有特色的PCR儀,當然好壞另議,就單其另辟蹊徑的技術(shù)能力和膽識就值的佩服。


  MJ:剛?cè)胫袊拿?,MJ的擴增儀在生命科研領(lǐng)域比較出名,其產(chǎn)品比較適合高通量檢測,人類基因組計劃用得很多。其實時熒光PCR儀剛進入中國不久,孔間能使用不同溫度是其特色。這點其實比較有用。

  伯樂:呵,廉價的麥當勞,ICYCLER是其主打,進入中國已經(jīng)比較久了,產(chǎn)品和5700一樣,是擴增儀上加裝定量模塊而成,特點是價格較低。

  國內(nèi)現(xiàn)在做的也很多,比如杭州博日、杭州朗基、上海楓嶺、廈門安普利等。

  【選購】

  準確的講包括實時熒光定量在內(nèi)都沒有自動加樣和標本處理系統(tǒng),只能算半自動的。PCR儀是個簡單的東東,一個溫控設(shè)備和一個檢測設(shè)備而已。

  關(guān)于溫控,主要是介質(zhì)問題。理想的介質(zhì)是導(dǎo)熱性好、比熱大、接觸緊密的東東。

  這方面好的是水浴和油浴,比熱大(油比水更大)、溶劑化物體,與反應(yīng)物無縫接觸,效果當然最好。但是自動化,小型化難,只有最初的水浴鍋式使用。

  硅加熱,這是使用普遍的一種,優(yōu)點:易自動化、速度快、直接加熱降溫,效果當然好,但是第一成本較高,第二其使用的介質(zhì)是金屬,導(dǎo)熱雖然好,但是與反應(yīng)管,很難做到無縫接觸,定性時代可以加油,但用熒光定最,由于油有熒光信號不能用。所以在無縫接觸上差一些。第三由于是底部加熱,下部壓力較大,有溢出的可能,不過新的儀器在加熱蓋以后解決了這個問題。

  空氣加熱,用空氣做介質(zhì)有優(yōu)點,與反應(yīng)體系無縫接觸,但是空氣的導(dǎo)熱性差、比熱小的弱點明顯。因此空氣加熱的要利用離心來產(chǎn)生空氣流動,增強導(dǎo)熱性,同時使用毛細管,加大接觸面積、試劑微量化來彌補。這樣做了以后效果還是不錯。但有的廠商把什么離心、毛細管的好處大講特講,對氣加熱的弱點閉口不談,卻是高明的市場手法。同時,使用離心,對標本量增大是有影響的并且標本量越大,空氣比熱小的弱點就越明顯,所以空所加熱的儀器標本量都比較小。使用毛細管后由于反應(yīng)液與管的接觸面積增大,吸附現(xiàn)象更大,因此試劑的通用性差一般要專門開發(fā),成本高,雖然試劑用量少,但因為是專用試劑,每人份就是以實際量算,并不省試劑。反而增加了毛細管成本。

  關(guān)于功能,所有的PCR儀功能都大體相同。只有MJ孔間能使用不同溫度比較,這對于多項目同時檢測以及循環(huán)參數(shù)的調(diào)整比較有用。但其實時熒光的儀器剛進入中國不久,具體如何還不得而知。

  關(guān)于選購,根據(jù)單位情況而定,由于PCR的技術(shù)含量其實并不高,好的國產(chǎn)儀器如杭州博日(與日本著名廠商大和有關(guān))也差不太多。關(guān)于進口儀器,羅氏的儀器不錯,但如果標本量大,建議不要用羅氏。一則會累死的。另外,每個標本要分攤的標準曲線、對照成本太高。同時,試劑也比較受限。

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