在農(nóng)藥殘留測(cè)試儀測(cè)試的幾個(gè)系統(tǒng)都是基于酶抑制，利用生物傳感器的原理有一些缺陷，環(huán)境和其他因素會(huì)導(dǎo)致酶活性的損失，造成假陽(yáng)性的結(jié)果。其不可逆性也造成了生物傳感器無(wú)法多次使用，而使用有機(jī)磷水解酶制備的生物傳感器可以克服上述缺點(diǎn)。
有機(jī)磷水解酶能催化水解有機(jī)磷農(nóng)藥。其反應(yīng)機(jī)理如下：X 代表氧原子或硫原子，R 是烷氧基，R‘是烷氧基或苯基，Z 是苯氧基，巰基，氰基或鹵素原子。根據(jù)上面原理可以分別設(shè)計(jì)成電位型或電流型傳感器。有機(jī)磷農(nóng)藥在有機(jī)磷水解酶的作用下生成了酚和酸，酸又會(huì)電離產(chǎn)生氫離子，產(chǎn)生氫離子的濃度和有機(jī)磷農(nóng)藥的濃度具有相關(guān)性，這構(gòu)成了制作電位型酶電極的基礎(chǔ)。將含有機(jī)磷水解酶的牛血清白蛋白與戊二醛混合溶液鋪展在 pH 電極表面，干燥形成交聯(lián)的酶層，用滲析膜包裹住酶層形成酶電極，測(cè)定對(duì)氧磷、對(duì)硫磷的檢出限為 2 μmol/L.這類(lèi)有機(jī)磷水解酶電位型生物傳感器制備簡(jiǎn)單快速，選擇性好，是在線檢測(cè)和解毒過(guò)程控制的理想分析工具。如果產(chǎn)生的酚具有電化學(xué)活性，則可以設(shè)計(jì)成為電流型酶電極。
該反應(yīng)能夠檢測(cè)到 0.2μmol/L 對(duì)硝基磷酯，1μmol/L 甲基對(duì)硫磷。這種方法利用了酶的催化作用，而不是利用酶的抑制作用，簡(jiǎn)單快速，適合在線檢測(cè)。酶抑制技術(shù)較為初應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)分析，該技術(shù)用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)始于 20 世紀(jì) 50 年代。酶抑制法是模擬生物的中毒機(jī)理，利用有機(jī)磷、氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥專(zhuān)一性地抑制生物中樞和周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)中膽堿酯酶活性其反應(yīng)原理為：
酶酶抑制法雖然有在室溫下穩(wěn)定不容易保存，不要具體農(nóng)藥定量技術(shù)問(wèn)題，但對(duì)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的大多數(shù)操作簡(jiǎn)單、快速檢測(cè)，靈敏度高，還需要**的儀器和設(shè)備，干擾因素少，穩(wěn)定的測(cè)定方法很容易掌握，結(jié)果優(yōu)勢(shì)越來(lái)越多的關(guān)注，該方法特別適于現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)及大量樣品篩選，克服了色譜法分析時(shí)間長(zhǎng)的缺點(diǎn)，具有較好的應(yīng)用前景。
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